PloS one
2026-01-01
Porównanie oznaczania komórek CD34+ między analizą cytometryczną przepływową a licznikiem komórek fluorescencyjnych ADAMII-CD34
Comparison of CD34+ cell enumeration between flow cytometric analysis and ADAMII-CD34 image-based fluorescence cell counter.
Recenzja AI
Cel badania
Celem badania było porównanie dokładności oznaczania komórek CD34+ za pomocą standardowej metody cytometrii przepływowej oraz alternatywnego licznika komórek ADAMII-CD34.
Metoda
Przeanalizowano 50 próbek (25 próbek aferezy PBSC i 25 próbek kriokonserwowanych produktów komórek macierzystych) od pacjentów poddawanych autologicznemu przeszczepowi PBSC lub zdrowych dawców, oceniając ilościową zgodność między metodami.
Wyniki
W próbkach aferezy PBSC licznik komórek ADAMII-CD34 wykazał prawie doskonałą zgodność z cytometrią przepływową, natomiast w przypadku kriokonserwowanych produktów komórek macierzystych zgodność była słaba.
Znaczenie dla praktyki
Licznik komórek ADAMII-CD34 może być bardziej przystępną i łatwiejszą w użyciu alternatywą dla cytometrii przepływowej w oznaczaniu komórek CD34+ w próbkach aferezy PBSC, co może mieć znaczenie dla optymalizacji kosztów i dostępności w praktyce klinicznej w Polsce.
Abstrakt oryginalny
BACKGROUND: Accurate CD34+ cell enumeration is essential in stem cell transplantation. Flow cytometry (FC) is the standard method to determine optimal collection time of CD34+ stem cells harvesting for peripheral blood stem cell (PBSC) transplantation but is costly and requires skilled personnel. The ADAMII-CD34 cell counter may be a feasible alternative for PBSC apheresis samples and for cryopreserved stem cell products which are assessed by manual cell viability counting using the trypan blue exclusion method. METHODS: Fifty samples were analyzed (PBSC apheresis samples n = 25, cryopreserved stem cell products n = 25) from patients undergoing autologous PBSC transplantation or healthy donors. We assessed the quantitative agreement between methods. RESULTS: In the 25 PBSC apheresis samples, FC-based median viable CD34+ absolute count was 764.7 cells/µL (IQR 453.7-1532.5; range 60.5-3233.8). ADAMII-CD34 cell counter and FC showed almost perfect agreement [Lin's concordance correlation coefficient (CCC) 0.99 (95% CI: 0.98 to 1.00), bias -0.46% (95% CI: -5.45 to 4.53), upper limit of agreement (LoA) 22.2% (95% CI: 13.5 to 30.8), and lower LoA -23.1% (95% CI: -31.7 to -14.4)]. For cryopreserved stem cell products, viable CD34+ cell dose (×106 cells/kg) measured by the ADAMII-CD34 cell counter and the estimated viable CD34+ cell dose (×106 cells/kg) determined by the trypan blue exclusion method showed poor agreement [Lin's CCC 0.58 (95% CI: 0.31 to 0.76)]. Weighted Deming regression showed proportional bias [95% CI: slope 0.02 to 0.61]. CONCLUSIONS: Quantitative agreement between the ADAMII-CD34 cell counter and FC for CD34+ enumeration in PBSC apheresis samples was acceptable within the analyzed range. It is user-friendly and more affordable than FC. However, ADAMII-CD34 and the trypan blue exclusion method of cryopreserved stem cell products showed a proportional bias. Further considerations are needed to optimize the process for cryopreserved stem cell products.